总糖的测定用什么方法(总糖的测定国标的方法)
- 作者: 杨唯希
- 来源: 投稿
- 2024-04-11
1、总糖的测定用什么方法
总糖的测定方法
总糖是食物中碳水化合物的一种重要成分,其含量直接影响食品的营养价值和品质。因此,测定食物中的总糖含量具有重要的意义。
1. 比色法
比色法是利用糖类与某些化学试剂反应后产生的有色物质的吸光度来测定糖类的方法。其中,最常用的比色法有以下两种:
蒽酮法:蒽酮在强酸性条件下与糖类反应生成绿色产物,其吸光度与糖类浓度成正比。
苯酚-硫酸法:苯酚与糖类在浓硫酸作用下生成黄橙色产物,其吸光度与糖类浓度成正比。
2. 电化学法
电化学法是利用糖类在电极上氧化或还原反应产生的电信号来测定糖类的方法。其中,最常用的电化学法有以下两种:
库伦法:库伦法是利用电流与氧化或还原的电子当量之间的关系来测定糖类浓度的方法。
安培法:安培法是利用氧化或还原过程中产生的电流强度与糖类浓度之间的关系来测定糖类浓度的方法。
3. 色谱法
色谱法是利用糖类在不同吸附剂或载体上的迁移速度或分布差异来分离和测定糖类的技术。其中,最常用的色谱法有以下两种:
薄层色谱法:薄层色谱法是用薄层板作为固定相,用溶剂作为流动相来分离和测定糖类的方法。
高效液相色谱法(HPLC):HPLC是以液体作为流动相,用高压将流动相推过固定相来分离和测定糖类的方法。
选择测定方法
不同的测定方法各有优缺点,具体选择哪种方法需要根据实际情况而定。一般来说,比色法操作简单、快速,适合于快速筛查和含量较高的样品。电化学法具有灵敏度高、选择性好等优点,但需要使用专用的仪器。色谱法具有良好的分离能力,可用于同时测定多种糖类,但操作较为复杂。
2、总糖的测定国标的方法
总糖的测定国标方法
1. 原理
总糖的测定是基于斐林试剂中硫酸铜和酒石酸钾钠与还原糖反应产生砖红色氧化亚铜沉淀的原理。反应的强度与糖浓度成正比,通过比色法测定沉淀的吸光度即可定量测定总糖含量。
2. 试剂
斐林试剂 A:硫酸铜溶液(0.008mol/L)
斐林试剂 B:酒石酸钾钠溶液(0.036mol/L)、氢氧化钠溶液(0.4mol/L)
葡萄糖标准溶液
蒸馏水
3. 仪器
紫外-可见分光光度计
比色皿
微量移液器
水浴箱
4. 步骤
1. 配制斐林试剂:等体积混合斐林试剂 A 和 B。
2. 制备标准曲线:使用葡萄糖标准溶液配制一系列浓度梯度标准溶液。
3. 样品处理:取一定体积样品于比色皿中。
4. 反应:加入等体积斐林试剂,混合后置于水浴箱中 15 分钟。
5. 冷却:反应结束后,立即冷却。
6. 测定吸光度:使用紫外-可见分光光度计在 650nm 波长处测定吸光度。
5. 计算
根据标准曲线,根据样品的吸光度求出糖浓度,再换算成总糖含量。
6. 注意要点
斐林试剂应现配现用,过夜后会失效。
水浴温度和时间应严格控制,否则会影响反应结果。
比色皿应保持清洁,光程一致。
样品中如有蛋白质等其他还原物质,会干扰测定结果。
3、总糖的测定方法有哪些
总糖的测定方法
总糖的测定对于食品工业、医学和科学研究至关重要。它可以用来评估食品的甜度、评估糖尿病患者的血糖水平以及研究糖代谢途径。以下是一些常见的总糖测定方法:
1. 费林法
费林法利用费林试剂(含硫酸铜和酒石酸根)氧化糖。糖被氧化成乙醛,乙醛与试剂中的三价铜离子形成砖红色的氧化亚铜沉淀,沉淀量的多少与糖的浓度成正比。
2. 伯努瓦法
伯努瓦法类似于费林法,但使用伯努瓦试剂(含磷酸钨酸和钼酸铵)作为氧化剂。糖被氧化成甲酸,与磷酸钨酸形成蓝色配合物,配合物的颜色强度与糖的浓度成正比。
3. 安松法
安松法利用浓盐酸水解糖,生成糠醛。糠醛与苯酚反应形成黄色的苯甲醛,苯甲醛的吸光度与糖的浓度成正比。
4. 酶促法
酶促法使用葡萄糖氧化酶(GOD)催化葡萄糖的氧化,生成过氧化氢。过氧化氢在过氧化物酶(POD)的催化下氧化显色底物,显色底物的颜色强度与糖的浓度成正比。
5. 高效液相色谱法 (HPLC)
HPLC 是一种色谱分离技术,可以对不同种类的糖进行定性和定量分析。糖样品在色谱柱中被分离,然后根据它们的保留时间和检测信号强度进行定量,以确定糖的浓度。
选择测定方法时需要考虑以下因素:
样品类型和糖含量
测定灵敏度和特异性
分析成本和时间
设备可用性和熟练程度